Coloration de Gram : qu’est-ce que c’est, objectif, procédure et résultats

Qu’est-ce qu’une coloration de Gram ?

Une coloration de Gram est un test de laboratoire qui recherche la présence de bactéries sur le site d’une infection suspectée ou dans certains fluides corporels. Un scientifique de laboratoire médical traite la coloration de Gram, qui donne des résultats relativement rapides, afin que les prestataires de soins de santé puissent savoir si des bactéries sont présentes et, si c’est le cas, le(s) type(s) général(s). Cela peut aider à orienter d’autres tests d’identification et options de traitement.

Les bactéries constituent un grand groupe d’organismes unicellulaires. Ils peuvent vivre à différents endroits de votre corps et sur votre peau. Si certains types de bactéries sont inoffensifs, voire bénéfiques, d’autres peuvent provoquer des infections et des maladies. Une coloration de Gram aide à diagnostiquer les bactéries nocives.

Sous une coloration de Gram, différents types de bactéries changent l’une des deux séries de couleurs (du rose au rouge ou du violet au bleu) sous une série spéciale de taches et sont classées en conséquence comme « Gram négatif » ou « Gram positif ». La coloration de Gram agit en différenciant les bactéries selon les propriétés chimiques et physiques de leurs parois cellulaires.

Cependant, toutes les formes de bactéries ne peuvent pas être testées à l’aide de la méthode de coloration de Gram, et les colorations de Gram ne fournissent généralement pas à elles seules un diagnostic. Au lieu de cela, ils aident à déterminer globalement le type de bactérie.

La coloration de Gram est une technique de coloration essentielle en microbiologie que les scientifiques utilisent depuis des centaines d’années. Il porte le nom du bactériologiste danois Hans Christian Gram, qui l’a introduit pour la première fois en 1882, principalement pour identifier les organismes responsables de la pneumonie.

Que sont les bactéries Gram-positives et Gram-négatives ?

Si des bactéries sont présentes sur une lame de coloration de Gram, un scientifique de laboratoire médical les classe comme Gram négatif ou Gram positif en fonction de la couleur qu’elles prennent sous une série de taches. Il existe également des bactéries à grammes variables, ce qui signifie qu’elles se colorent de manière irrégulière, et il existe un mélange de bactéries de couleur rose et violette.

Il est important de noter que Gram négatif ne signifie pas qu’il n’y a pas de bactéries, et que « positif » et « négatif » ne signifie pas « bon » ou « mauvais » dans ce cas.

Organismes à Gram positif

Les bactéries à Gram positif ont des parois cellulaires qui contiennent d’épaisses couches de peptidoglycane, une substance qui forme les parois cellulaires de nombreuses bactéries. Le peptidoglycane forme environ 90 % de la paroi cellulaire des bactéries à Gram positif. Cela les fait apparaître du bleu au violet sous une coloration de Gram.

Les organismes à Gram positif comprennent :

• Staphylocoqueespèces.
• Streptocoqueespèces.
• Corynebactérieespèces.
• Clostridiumespèces.
• Listeriaespèces.

Organismes à Gram négatif

Les bactéries à Gram négatif ont des parois cellulaires avec de fines couches de peptidoglycane (10 % de la paroi cellulaire) et une teneur élevée en lipides (acides gras). Cela les fait apparaître du rouge au rose sous une coloration de Gram.

Les organismes à Gram négatif comprennent :

• Neisseria gonorrheae et Neisseria meningitidis.
• Moraxelleespèces.
• Escherichia coli(E. coli).
• Pseudomonasespèces.
• Protéeespèces.
• Klebsiellaespèces.

Quelle est la différence entre une coloration de Gram et une culture bactérienne ?

Les prestataires de soins de santé utilisent à la fois des colorations de Gram et des cultures bactériennes s’ils soupçonnent que vous souffrez d’une infection bactérienne. Cependant, ces tests fournissent des informations différentes.

Les prestataires demandent généralement des tests de culture bactérienne en plus des tests de coloration de Gram. Lors d’un test de culture bactérienne, un scientifique de laboratoire médical prélève des cellules de l’échantillon qui sert également à la coloration de Gram et le place dans un environnement spécial pour favoriser la croissance cellulaire. Les résultats sont souvent disponibles en quelques jours, mais certains types de bactéries se développent lentement, ce qui peut prendre plusieurs jours, voire plus. Une fois que les cellules se sont suffisamment multipliées et développées, un scientifique de laboratoire médical examine les bactéries cultivées pour déterminer leur identité exacte.

Une coloration de Gram consiste à appliquer une coloration sur un échantillon dans des lames de microscope en verre et à l’examiner au microscope pour déterminer si des bactéries sont présentes. Si des bactéries sont présentes, les scientifiques du laboratoire médical peuvent voir si elles sont à Gram négatif ou à Gram positif selon si les bactéries apparaissent du rose au rouge ou du violet au bleu sous la tache. Différents types de bactéries sont soit à Gram négatif, soit à Gram positif.

Bien que les colorations de Gram fournissent des résultats plus rapides que les cultures bactériennes, dans la plupart des cas, une coloration de Gram ne permet pas de diagnostiquer le type de bactérie, contrairement à une culture bactérienne. Cependant, les colorations de Gram peuvent aider à orienter les prestataires de soins de santé dans la bonne direction pour prescrire un traitement.

Quelles conditions les colorations de Gram aident-elles à diagnostiquer ?

Les prestataires de soins de santé commandent des colorations de Gram pour aider à diagnostiquer et à traiter certaines infections bactériennes, telles que les infections des voies urinaires (IVU) et la pneumonie bactérienne. Les prestataires ne demandent pas toujours une coloration de Gram pour aider à diagnostiquer les affections causées par des bactéries. Par exemple, ils ne font généralement pas de coloration de Gram en cas d’intoxication alimentaire, mais il est possible de le faire grâce à un échantillon de selles (caca).

Bactéries Gram-négatives courantes et leurs conditions associées

Voici des exemples de bactéries à Gram négatif (en italique) et des affections qu’elles peuvent provoquer :

• Escherichia coli : Infections des voies urinaires (IVU) et intoxication alimentaire.
• Legionella pneumoniae: Maladie du légionnaire.
• Salmonella : Intoxication alimentaire et fièvre typhoïde.
• Klebsiella: Pneumonie, infections du sang, infections des plaies ou du site opératoire et méningite bactérienne.
• Neisseria gonorrhée: Gonorrhée.
• Protée: infections urinaires.
• Morganella morganii: infections urinaires, sepsis, pneumonie, infections des plaies, infections musculo-squelettiques, infections du système nerveux central et péricardite.
• Aéromonas: Infections oculaires, ostéomyélites, méningites bactériennes, infections respiratoires suite à une « quasi-noyade » et infections articulaires.

Bactéries Gram-positives courantes et leurs conditions associées

Voici des exemples de bactéries à Gram positif (en italique) et des affections qu’elles peuvent provoquer :

• Streptococcus pneumoniae: Pneumonie bactérienne.
• Staphylocoque doré: Pneumonie bactérienne, Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline (SARM) et syndrome de choc toxique.
• Espèce de streptocoque du groupe A: Infections streptococciques de la gorge.
• Listeria : Intoxication alimentaire.
• Clostridium: Intoxication alimentaire
• Clostridium botuliqueetClostridium butyricum: Botulisme.

Quand un test de Gram est-il effectué ?

Les prestataires de soins de santé demandent généralement une coloration de Gram ainsi qu’une culture bactérienne lorsqu’ils soupçonnent que vous avez une infection bactérienne, ou parfois fongique. C’est l’un des moyens les plus courants de diagnostiquer rapidement une infection bactérienne dans votre corps.

Qui effectue un test de coloration de Gram ?

En fonction du type d’infection que vous pourriez avoir, de nombreux types de prestataires de soins de santé peuvent prélever un échantillon pour un test de coloration de Gram. Par exemple, un gynécologue peut prélever un écouvillon pour un test de coloration de Gram pour la gonorrhée et un pneumologue peut prélever un échantillon de vos crachats ou du mucus de votre toux pour l’utiliser pour un test de coloration de Gram pour la pneumonie bactérienne.

Votre prestataire place ensuite l’échantillon dans un récipient stérile et l’envoie à un laboratoire pour analyse. Un scientifique de laboratoire médical applique l’échantillon sur des lames de microscope, applique une série de taches et examine l’échantillon au microscope. Ils rédigent un rapport et le partagent avec votre professionnel de la santé.

Comment puis-je me préparer à un test de coloration de Gram ?

Vous n’avez rien de spécial à faire pour vous préparer à un test de coloration de Gram.

Comment se déroule un test de coloration de Gram ?

Un test de coloration de Gram comporte trois étapes générales, notamment :

• Collecte de l’échantillon.
• Traitement de l’échantillon.
• Examen de l’échantillon.

Collecte de l’échantillon de coloration de Gram

Un test de coloration de Gram implique que votre médecin prélève un échantillon sur un site d’infection suspectée. Voici quelques-unes des façons dont un prestataire peut collecter des échantillons de test de coloration de Gram :

• Brosser ou gratter les tissus de la surface d’une partie de votre corps.
• Collecte d’échantillons de fluides ou d’écoulements de votre corps.
• Utiliser l’aspiration à l’aiguille fine pour prélever un échantillon de liquide dans une zone de votre corps.

Les sites collectés par un écouvillon avec brossage et grattage peuvent inclure votre :

• Gorge.
• Les narines.
• Organes génitaux.
• Plaies cutanées.

Les échantillons que vous pouvez collecter directement dans un récipient stérile comprennent :

• Cracher (crachat).
• Urine (pipi).
• Tabouret (caca).

Les zones de votre corps qui peuvent nécessiter l’utilisation d’une aspiration à l’aiguille fine comprennent :

• Liquide synovial dans vos articulations.
• Liquide autour de votre cœur (liquide péricardique).
• Liquide autour de vos poumons (liquide pleural).
• Liquide céphalo-rachidien (LCR) autour de votre moelle épinière.

Votre prestataire place ensuite l’échantillon dans un récipient stérile et l’envoie à un laboratoire pour analyse.

Procédure de coloration de Gram

Au laboratoire, un scientifique de laboratoire médical étale ou étale l’échantillon sur des lames de microscope en verre. Ces lames sont appelées frottis. Ils appliquent ensuite une série de taches sur le frottis pour réaliser une coloration de Gram.

Le processus de coloration de Gram comprend quatre étapes de base, notamment :

1. Application d’une teinture primaire (violet cristal).
2. Ajout d’un mordant (iode de Gram).
3. Décoloration rapide avec de l’éthanol, de l’acétone ou un mélange des deux.
4. Contre-coloration à la safranine.

Examen de la coloration de Gram

Le scientifique du laboratoire médical classe ensuite toutes les bactéries pouvant être présentes par couleur et forme lors de l’évaluation microscopique :

• Couleur: Généralement, les bactéries Gram-positives apparaissent du violet au bleu, et les bactéries Gram-négatives apparaissent du rose au rouge.
• Forme: Les formes les plus courantes incluent le rond (coques) ou en forme de tige (bacilles).

Le scientifique du laboratoire médical recherche également des caractéristiques supplémentaires de l’échantillon en observant les regroupements de bactéries sur la lame. Les exemples incluent :

• Cocciqui sont présents seuls, par paires, en groupes de quatre, en grappes ou en chaînes.
• Bacillesqui sont épaisses, minces, courtes, longues ou qui ont des spores élargies à une extrémité.
• Si des bactéries sont présentes dans les globules blancs.

Le scientifique du laboratoire médical rédige ensuite un rapport et l’envoie à votre professionnel de la santé.

Quels sont les risques d’un test de coloration de Gram ?

Il n’y a aucun risque d’avoir une coloration de Gram qui implique un prélèvement ou une collecte de liquide d’expectorations (crachats), d’urine ou de selles.

Il y a très peu de risques à subir des analyses de sang. Vous pouvez avoir une légère sensibilité ou une ecchymose au site de la prise de sang, mais cela disparaît généralement rapidement.

Les risques possibles d’aspiration à l’aiguille fine comprennent :

• Inconfort ou douleur.
• Saignement.
• Infection.
• Dommages aux structures voisines.

Que signifient les résultats d’une coloration de Gram ?

Les résultats du test de coloration de Gram révèlent l’une des deux catégories suivantes : une coloration de Gram négative ou une coloration de Gram positive. Il ne faut pas confondre cela avec les bactéries Gram-négatives ou les bactéries Gram-positives.

Coloration de Gram négative

Si le résultat de votre test révèle une coloration de Gram négative ou « aucun organisme observé », cela signifie généralement qu’il y a trop peu de bactéries présentes pour pouvoir être détectées à l’aide de la méthode de coloration de Gram. Les bactéries peuvent toujours être détectées par culture si une culture est réalisée sur l’échantillon.

Coloration de Gram positive

Si le résultat de votre test révèle une coloration de Gram positive, cela signifie que des bactéries étaient présentes dans votre échantillon. Si votre résultat est positif, il comprend généralement des informations sur le type d’organisme présent sur la lame d’échantillon, notamment :

• Type de bactérie: Gram positif ou Gram négatif.
• Forme des bactéries: Rond (coques) ou des tiges (bacilles).
• Autres caractéristiques des bactéries: Taille, quantité relative (nombre) et/ou disposition des bactéries, le cas échéant.
• Autres cellules: S’il y a des bactéries présentes dans d’autres cellules (intracellulaires) et s’il y a une présence de globules rouges ou de globules blancs.
• Champignons: Les colorations de Gram permettent de vérifier la présence de champignons sous forme de levures ou de moisissures. Vous aurez peut-être besoin de tests supplémentaires pour identifier le type spécifique.

Ces informations, ainsi que les signes et symptômes et autres résultats cliniques, aideront votre médecin à déterminer quel traitement peut être le plus efficace, parfois avant que les résultats des cultures bactériennes ne soient disponibles.

Quand dois-je connaître les résultats du test ?

Les colorations de Gram donnent généralement des résultats rapides. Cependant, les résultats de la coloration de Gram sont généralement considérés comme préliminaires, ce qui signifie qu’ils ne peuvent pas toujours fournir à eux seuls un diagnostic. Les résultats d’une culture bactérienne et/ou d’autres tests, tels que des tests d’antigènes et d’anticorps pour des types particuliers de bactéries, peuvent être nécessaires pour confirmer un diagnostic.

Quand dois-je appeler mon médecin ?

Si on vous a diagnostiqué une infection et que vous rencontrez des problèmes avec votre traitement ou si votre infection ne s’améliore pas, contactez votre professionnel de la santé.